应用SoloVPE进行UV浓度检测

来自FUJIFILM Diosynth Biotechnologies的科学家在《BioProcess International》发表了题为“Application of SoloVPE to UV Concnetration Measurement”的文章，文中提到他们正在使用UV-vis光谱法的最新革命性产品 - SoloVPE。简单易用的SoloVPE系统可在1min内进行准确的浓度检测，而同比的UV方法可能需要1hr多。这种差别即意味着花在繁琐的工艺内检测的时间更少，而可将更多的时间花在产品制备上。该系统可在不做稀释的情况下检测浓度，这就避免了样品制备中吸液和混合而产生的误差。

SoloVPE系统以可变光程检测，以确定吸光度的线性范围，因其与光程相关。样品浓度根据斜率光谱公式计算，其基于Beer-Lambert法则。

测试证实了在不经稀释条件下，浓度范围为25μg/mL – 240mg/mL的多种蛋白质的动态范围，精确性和可重复性偏差低于2%。SoloVPE被证实与已经建立的、使用固定光程的标准UV-vis光度计方法性能相当或更出色。此外，根据样品浓度，系统要求的最小体积不超过10μl。

由于不需要样品处理，且SoloVPE系统的核心仍是UV技术，仪器和方法的验证非常简便。相同的SoloVPE方法可用于分析和工艺开发、质量控制以及生产。如在生产车间已经使用了该系统，则不再需要将STAT UV样品送至QC进行工艺内检测。

相比标准UV-Vis光度计，使用SoloVPE的优势包括消除了稀释时间、废液和误差，同时提高样品分析的精确性和可重现性。SoloVPE系统代表了针对总蛋白浓度分析能力的一大步跨越。

Mab样品的全谱扫描和斜率分析；光程范围0.005-0.100mm；测得的浓度为174.1mg/mL；对照175mg/mL的预期浓度，精确度为99.5%（G. Adams，2016）。

原文：G. Adams, Application of SoloVPE to UV Concnetration Measurement. BioProcess International, 2016.

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可变波长斜率光谱法

SoloVPE是基于Slope Spectroscopy®（斜率光谱法）技术的技术创新。与使用单个绝对吸光度值的传统UV-Vis方法不同的是，斜率光谱法使用区段数据（吸光度值 vs. 光程数据）来确定斜率值，以使用源于Beer-Lambert法则的斜率光谱公式（m=ec）来对样品浓度进行定量。

无需稀释

SoloVPE中的可变光程技术可允许对高度浓缩的样品进行检测，通常不需要稀释和基线校准。拥有国际专利的SoloVPE已被众多全球化机构组织采用，帮助其提高检测精确性，同时节省时间和成本。

无需基线校准

通常，所有标准的吸光度检测方法计算浓度时，基于单个吸光度值。在斜率方法中，当斜率等于零时，不需要进行缓冲液校准。所以，所选的缓冲液不会影响样品，即可从方法/实验中取消。

证明真正的线性

线性回归的R²值确认了吸光度值和光程呈正比变化，符合Beer-Lambert法则，继而证明每个检测样品的精确性。

特点和优势

· 无需稀释

· 基于斜率的检测方法，R²为0.999或更高

· 无需基线校准/无需缓冲液

· Beer法则线性范围内有保证的数据结果

· 通用平台UV

· 可重复性偏差：±2%

· 每个样品读数低于1min

· 抗体浓度范围：0.01mg/ml - 300mg/ml

· 最低体积：＜20μl（取决于浓度）

· 光程范围：0.005mm - 15mm（最小分辨率：0.005mm（5μm））

· 波长范围：190nm-1100nm

· 21 CFR Part 11合规软件

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SoloVPE可变光程紫外-可见分光光度计——基于斜率光谱法的革新光谱技术

The power of Slope Spectroscopy: SoloVPE transforms UV specotroscopy

 徐天闻 Tony Xu

Niche Technologies / C Technologies

摘要：SoloVPE是应用斜率光谱法（Slope Spectroscopy）开发的可变光程的紫外-可见分光光度计。通过灵活应用郎伯-比尔定律（Beer-Lambert Law）和创新性的光纤技术，SoloVPE的出现革新了延续半个多世纪的传统紫外光谱技术，为广泛的分析工作尤其生物制药等领域的客户提供了更快速、便利和准确的浓度测定解决方案。

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